石蠟切片如何快速操作完成？
（一）應(yīng)用范圍
（1）替代冷凍切片，在沒有條件制作冷凍切片的單位，用作術(shù)中診斷；
（2）快速診斷：適用于門診外地患者，1天可取報告。
（二）切片制作
（1） 將送檢的各類組織按《規(guī)范》（一）編號登記、眼觀、描述記錄后，用大頭針和羊皮紙包好，投入配制好的固定液燒杯內(nèi)5~10min(固定液配制：95％乙醉85ml，甲醛10ml，冰醋酸5ml)；若組織較厚，可在預(yù)固定后修薄，重復(fù)固定；
（2）無水乙醇、丙酮脫水3~5min；
（3）浸蠟5min；
（4）常規(guī)石蠟包埋，或封固于預(yù)制好的蠟塊內(nèi)；
（5）常規(guī)HE加溫染色。
（三）注意事項(xiàng)
（1） 制作快速石蠟切片全過程過程均加溫在65~72℃范圍內(nèi)操作，可用快速組織處理儀、或在恒溫水浴鍋或恒溫箱內(nèi)完成；
（2） 替代冷凍切片可隨到即做，一般在30min內(nèi)完成；若成批操作，則可根據(jù)標(biāo)本的數(shù)量多少，酌情延長時間；
（3） 制作快速石蠟切片，操作人員必須經(jīng)過一段時間的訓(xùn)練和摸索，在取得一定經(jīng)驗(yàn)、技術(shù)較熟練能保證切片質(zhì)量后，方可受理對外服務(wù)，以把好質(zhì)量關(guān)
石蠟切片的制作方法？
腸道的石蠟切片的制作
（1） 取材：用鋒利的刀切取羅非魚的一小段前腸（據(jù)胃5cm左右位置的前腸），組織塊的規(guī)格為 3～5mm×3～5mm×10～15mm。
（2） 固定：采用Bouin氏固定液裝瓶固定，固定液用量一般為組織塊體積的10～20倍。
（3） 沖洗：固定12～24h后，將材料自固定液中取出后，在70%酒精中換洗幾次，可在酒精中加幾滴氨水至洗去黃色為止。
（4） 脫水：70%酒精（1h）→80%酒精（1h）→90%酒精（1h）→95%酒精（1h）→無水乙醇Ⅰ（1h）→無水乙醇Ⅱ（1h）
（5） 透明：無水乙醇與二甲苯溶液（1:1）（1h）→二甲苯Ⅰ（1h）→二甲苯Ⅱ
（1h）
（6） 浸蠟：浸蠟的全過程應(yīng)在恒溫設(shè)備中進(jìn)行，將恒溫箱調(diào)至58℃。
二甲苯與石蠟混合液（1:1）（1h）→石蠟Ⅰ（1h）→石蠟Ⅱ（1h）
浸蠟必須徹底，否則組織內(nèi)殘留透明劑會造成切片過程的困難和影響切片
的質(zhì)量。
（7） 包埋：在小紙盒內(nèi)注入溶化的石蠟，將已浸蠟的組織塊置入其內(nèi)，使蠟塊迅速冷卻硬固，組織塊在蠟塊中可長期保存。
（8） 切片：包埋后的組織塊經(jīng)修整后，用切片機(jī)切成5~7μm的石蠟帶。
（9） 粘片：將組織石蠟帶在50攝氏度的溫水中展片，然后用經(jīng)1%HCl溶液處理干凈的載玻片撈片，組織帶即可粘在載玻片上。
（10） 烤片：將粘好的載玻片置于35℃左右的溫箱中烤干，待2~3小時后，即可取下編號。
（11） 蘇木精—伊紅染色：將烤干的片進(jìn)行染色。
①脫蠟：將烤干的切片放入二甲苯(I)10min→二甲苯(Ⅱ)10rain。
②復(fù)水：將脫蠟后的切片移入100％酒精5min→95％酒精5min→85％酒精5min→70％酒精5min→蒸餾水5min
③HE染色顯示腸道黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞：將蒸餾水洗滌后的切片移入Harris蘇木精液中，10min，使細(xì)胞核著色；用自來水洗去切片上殘余染液；用1％的鹽酸酒精分色3秒；用自來水浸洗3h，顯微鏡下觀察，直到胞核藍(lán)化為止；然后切片入曙紅溶液中染色5min，使細(xì)胞質(zhì)著色。經(jīng)95％酒精與100％酒精脫水，二甲苯透明后，中性樹膠封片。
④奧新蘭一沙黃染色顯示腸道內(nèi)肥大細(xì)胞：切片常規(guī)脫蠟下行至蒸餾水→奧新蘭一沙黃液染色15～20min→蒸餾水速洗，鏡檢→95％和100％酒精分色脫水1—2min→二甲苯透明→中性樹膠封片。
⑤阿利新蘭醋酸染色顯示腸道內(nèi)杯狀細(xì)胞：切片經(jīng)脫蠟下行入蒸餾水→阿利新蘭醋酸染色10min→蒸餾水洗→1％高碘酸水液氧化5min→蒸餾水略洗一Schiff試劑染色（37℃恒溫箱）30min→普通水洗3次→蒸餾水2min→Ehrlich蘇木精染色5min→95％酒精和100％酒精脫水→二甲苯透明，中性樹膠封片。
切片經(jīng)脫蠟下行入水：二甲苯(30 min)一二甲苯(10 min)一無水乙醇(5 min)一無水乙醇(5 min)一
95％ 乙醇(5 min)一85％乙醇(5 min)一70％ 乙醇(5 min)一流水沖洗(20 min)。人Ehrlich蘇木精染
色12 min，蒸餾水速洗。鹽酸酒精分色，鏡檢控制時間。入伊紅染色2 min，蒸餾水略洗。鹽酸酒精分色，鏡檢控制時間。經(jīng)95％酒精與無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。
阿利新蘭—番紅復(fù)合染色液的方法稱Scaba法
阿利新蘭—番紅分別染色的方法稱Spicer法
請問眼球的石蠟切片和冰凍切片有什么區(qū)別？各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？
1．冰凍切片 是免疫組織化學(xué)染色中最常用的一種切片方法。其最突出的優(yōu)點(diǎn)是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性，尤其是細(xì)胞表面抗原更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。
冰凍時，組織中水份易形成冰晶，往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時，影響較小，冰晶小而多時，對組織結(jié)構(gòu)損害較大，在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長速率成正比，而與成核率（形成速率）成反比，即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小，對組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此，應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開始時，冰晶成核率較慢，以后逐漸增加，其臨界溫度為-33。C,從-30。C降至-43。C之間，成核率急劇增加達(dá)1018，然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成
2．石蠟切片 其優(yōu)點(diǎn)是組織結(jié)構(gòu)保存良好，在病理和回顧性研究中有較大的實(shí)用價值，能切連續(xù)薄片，組織結(jié)構(gòu)清晰，抗原定位準(zhǔn)確。用于免疫組化技術(shù)的石蠟切片制備與常規(guī)制片略有不同：①脫水、透明等過程應(yīng)在4℃。C下進(jìn)行，以盡量減少組織抗原的損失。②組織塊大小應(yīng)限于2cm×1.5cm×0.2cm，使組織充分脫水、透明、浸蠟。③浸蠟、包埋過程中，石蠟應(yīng)保持在60℃以下，以溶點(diǎn)低的軟蠟最好（即低溫石蠟包埋）。
石蠟切片的優(yōu)缺點(diǎn)
石蠟切片的優(yōu)點(diǎn),能得到比較薄的連續(xù)切片..缺點(diǎn),操作比較繁瑣,時間比較長..
石蠟切片與冷凍切片的區(qū)別是什么
簡單的說,石蠟切片是標(biāo)本要這固定后經(jīng)脫水,浸蠟后才能用于切片,冷凍切片是直接把標(biāo)本放在切片機(jī)上使它即刻冰凍,就可以切片了.再簡單的說一種是要經(jīng)過很多工序才能用于切片,一種是直接用于切片.
石蠟切片問題·
是一部分切碎,還是全部是粉末的,1)石蠟切片一般是7、8微米,如果組織能看清的話適當(dāng)加厚一點(diǎn)會不會好一點(diǎn),2)刀片一定要鋒利,從一邊用向另一邊,3)切得什么莖稈,是不是莖桿表皮太硬,有沒有進(jìn)行軟化4)還有可能100%酒精脫水或二甲苯中時間過長,材料太脆了,我能想到的只能這些了,希望有幫助
如何制作石蠟切片?
[1]請教丁老師如何制作皮膚的石蠟切片
一 皮膚組織標(biāo)本制作及常用染色方法概述
皮膚組織標(biāo)本常規(guī)以福爾馬林固定，石蠟包埋，蘇木素－伊紅(Hematoxylin eosin HE)染色。皮膚組織的制片及染色技術(shù)與普通病理相同：標(biāo)本固定－水洗－硬化、脫水－透明－包埋－切片－染色。但皮膚組織亦有其自身特點(diǎn)，如表皮細(xì)胞層次多，纖維及脂肪組織豐富，在取材及固定方面有其特殊性，制片及染色過程也應(yīng)注意其特點(diǎn)，以提高制片質(zhì)量。
二 取材
a取材要足夠大，應(yīng)包括一小部分正常組織，以便與病理組織對照，因許多皮膚病的典型病變在真皮深層或皮下組織，故還應(yīng)包括皮下組織,
b多數(shù)情況下應(yīng)選擇充分發(fā)展的損害，早期損害常為非特異性，晚期損害的病變大都處于恢復(fù)或變性、壞死階段，充分發(fā)展的損害容易找到典型病變而明確診斷，還應(yīng)盡量選擇損害的活動邊緣部分，中央部分可能病變已趨向于消退而找不出典型病變。對于水皰性、膿皰性以及含有病原體的損害應(yīng)取早期損害，否則，若發(fā)生繼發(fā)性改變(如變性、再生或繼發(fā)性感染)可能隱蔽了重要病變的組織形態(tài)，同時，很難辨別病變形成的過程,
c盡量避免切除腋窩或腹股溝等部位皮膚組織，因該處皮膚由于磨擦，搔抓等常有萎縮,
d如疑有血管性或血液性疾患，最好不要取下肢標(biāo)本，因下肢常有血液停滯或其它肢端血管病，皮內(nèi)可能有含鐵血黃素沉著,
e對某些腫瘤，如角化棘皮瘤，Spitz痣等，應(yīng)盡可能將腫瘤全部切除，若不能全部切除，則最好自腫瘤中心至邊緣取一楔形標(biāo)本，以供組織學(xué)檢查。
三 固定
切下皮膚愈早固定愈好，夏天超過4小時，冬天超過24小時，標(biāo)本體積就要收縮變形或發(fā)生自溶。常用固定液為10％中性福爾馬林，其總體積應(yīng)為組織塊總體積的7～10倍，用10％福爾馬林固定小塊組織(1.5 cm×1.5 cm×0.2cm)數(shù)小時即可，時間稍長對制片影響不大，隨著溫度的增高可縮短固定時間，對固定時間過長的標(biāo)本，可在制作切片時，用流水沖洗24小時，甚至48小時，以免影響染色效果。
四 脫水、包埋、切片及染色
皮膚組織常用酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，切片厚度一般為5μm～7μm，與普通病理切片操作程序相同。HE染色法方便、經(jīng)濟(jì)，結(jié)果穩(wěn)定，95％以上的組織切片都可以在HE染色下作出診斷，是皮膚組織病理最常用的方法。
[2]http://www.pathology-home.com/html/pathology/20051207_1.asp
自己點(diǎn)進(jìn)去看吧，太多了 復(fù)制不了
制作石蠟切片 一般需要那些耗材 詳細(xì)一點(diǎn) 謝謝了
石蠟切片機(jī)、恒溫蠟箱、載玻片、蓋玻片;乙醚、無水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、重鉻酸鉀、鋨酸、正丁醇、二甲苯、石蠟、甘油、加拿大樹膠
凡士林里面的“切片石蠟”是什么東西?
石蠟的用途是十分廣泛的.將紙張浸入石蠟后就可制取有良好防水性能的各種蠟紙,可以用于食品、藥品等包裝、金屬防銹和印刷業(yè)上;石蠟加入棉紗后,可使紡織品柔軟、光滑而又有彈性;石蠟還可以制得洗滌劑、乳化劑、分散劑、增塑劑、潤滑脂最等. 所以切片石蠟主要是指把石蠟切片弄碎,增加凡士林的潤滑感
如何制作共聚焦顯微鏡的細(xì)胞切片
如何制作共聚焦顯微鏡的細(xì)胞切片
石蠟切片法 ：
石蠟切片法是以石蠟作包埋劑,用旋轉(zhuǎn)切片機(jī)將材料切成薄片,經(jīng)一系列處理制成永久制片的方法.在研究植物的細(xì)胞,組織,胚胎以及形態(tài)等方面石蠟切片法是最理想的制片方法.
石蠟切片法的一般流程為:取材→固定→抽氣→洗滌→脫水→透明→浸蠟→包埋→修塊→切片→粘片→染色→封片.
取材
用鋒利的刀片切取新鮮的植物材料,選定適宜的材料,立即固定.
取材的注意事項(xiàng)如下:
(1)取材料要新鮮.動作要迅速,以免擠壓損壞組織;取病理材料時,應(yīng)設(shè)置對照材料.
(2)所取材料大小要適當(dāng):根和莖一般直徑≤5mm,切取成5-10mm小段;葉片一般取過中脈處,切成2-5mm寬,5-8mm長.在切材料時,必須注意刀片與中軸成直角,兩切面平行,否則制成的切片細(xì)胞是斜的. 雌,雄蕊一般不需分割.
(3)取材時間可根據(jù)切片要求有所區(qū)別.如:在進(jìn)行植物發(fā)育的研究過程時,需要找到細(xì)胞分裂相,一般在晴天的早晨9:00-10:00時取材,此時植物細(xì)胞分裂活動較明顯.
(4)取材不易過老,否則制片有難度(過老的材料須在滑走切片機(jī)上進(jìn)行);對縱切的材料適當(dāng)多取材,如根尖,莖尖等,因?yàn)榍械讲牧险械母怕瘦^低.
(二)固定
將已切好的材料盡快地浸入相當(dāng)于材料10-15倍體積的固定液中.借助固定液的作用,使細(xì)胞的新陳代謝瞬時停止,并保持細(xì)胞或組織的形態(tài)構(gòu)造及其內(nèi)含物的狀態(tài)不發(fā)生變化.從而達(dá)到使組織變硬從而便于切片,增強(qiáng)內(nèi)含物的折光度,令細(xì)胞易于著色的目的,同時具有防腐作用.以新鮮配制固定液效果較好.固定的時間依材料的種類,性質(zhì),大小等而定.材料固定完畢,保存于加蓋的容器內(nèi),貼上標(biāo)簽.
良好的固定劑,應(yīng)是穿透力強(qiáng),使細(xì)胞立刻致死,原生質(zhì)全部凝固;不發(fā)生任何變形,增強(qiáng)折光率,并且不妨礙染色.
常用固定液:
簡單固定液 以一種化學(xué)藥品配制的固定液.